Ідентифікація клітинної лінії та банку клітин
Ідентифікація клітинної лінії та банку клітин є нормативною вимогою. Клітинні лінії та клітинні банки, які використовуються в антитілах, білкових препаратах і продуктах клітинної терапії, повинні забезпечувати їх якість, чистоту та безпеку. Правильна ідентифікація клітинної лінії та банку клітин має вирішальне значення у виробництві біофармацевтичних препаратів.
Методи ідентифікації клітинних ліній та банків клітин
Ідентифікація клітинних ліній і банків клітин насамперед спрямована на основні банки клітин (MCB) і робочі банки клітин (WCB). Крім того, дослідницькі клітинні банки (RCB) зазвичай проходять мікобактеріальну перевірку та перевірку на стерильність перед тим, як їх включити до GMP для виробництва MCB. Виробники також можуть вимагати специфічного тестування на віруси.
Згідно з діючими правилами (наприклад, ICH Q5A/Q5B/Q5D), ідентифікація клітинних ліній і банків клітин в основному включає такі аспекти: ідентифікація клітин, тестування на стерильність, тестування на мікоплазму, тестування на ендогенне та екзогенне вірусне зараження та тестування на пухлиногенність. Елементи та методи тестування, надані HyQure Biotech, описані нижче:
|
Тестування елементів |
Методи виявлення |
|
|
Ідентифікація клітин |
Ізоферменти, CO1, STR, ідентифікація видів |
|
|
Бактеріальне та грибкове дослідження |
Мембранна фільтрація, пряма інокуляція та респіраторний сигнальний метод |
|
|
Тест на мікоплазму |
Метод прямого культивування, метод індикаторної культури клітин, метод КПЦР (для тестування на мікоплазму та спіроплазму) |
|
|
Мікобактеріальний тест |
Культуральний метод, метод КПЦР |
|
|
Тестування на екзогенні та ендогенні вірусні агенти |
Спостереження морфології клітин та адсорбції крові |
Спостереження за морфологією клітинної культури та тест на адсорбцію крові |
|
Посів in vitro різних індикаторних клітин |
Дослідження цитопатичної дії |
|
|
Інокуляція тварин і курячих ембріональних яєць in vivo |
Курячі яйця з ембріонами, молочні та дорослі миші тощо. |
|
|
Тест на ретровірус |
Тест на інфекційність, електронна мікроскопія, активність зворотної транскриптази (TEM-PERT) |
|
|
Вид{0}}тестування на віруси |
Миша-походить, людина-походить, мавпа-походить |
|
|
Тестування на вірус великої рогатої худоби |
Дослідження цитопатичної дії, метод КПЦР |
|
|
Тестування на свинячий вірус |
Дослідження цитопатичної дії, метод КПЦР |
|
|
Інші специфічні тести на віруси |
Тест на парвовірус мишей та ін. |
|
|
Дослідження на онкогенність |
Досліди на тваринах |
|